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SARS-CoV-2抑制剂筛选试剂盒

背景
2019新型冠状病毒(SARS-CoV-2)通过表面刺突(Spike)蛋白来附着并侵入宿主细胞,S蛋白包括S1和S2两个亚基,其中S1亚基上的RBD可以与人体肺部分细胞表面的ACE2(血管紧张素转换酶2)结合,使病毒膜与宿主细胞膜融合而完成入侵过程。因此,S蛋白和S1是新冠病毒治疗药物开发中的重要靶点。如何有效阻止新冠病毒入侵人体细胞,快速筛选出具有病毒中和效果的大分子和小分子药物,是重要的抗新冠病毒药物开发关键性策略之一。
SARS-CoV-2抑制剂筛选试剂盒可对SARS-CoV-2抑制剂进行高效快速地筛选。试剂盒应用竞争ELISA原理,SARS-CoV-2抑制剂可抑制固定化的SARS-CoV-2 S RBD蛋白与生物素标记human ACE2蛋白之间的结合。相比同类产品,采用生物素标记ACE2蛋白通用性更好,可以筛选更多种属的抗体与小分子化合物抑制剂,且检测不受影响。抑制剂通过阻断或中和蛋白之间的相互作用可产生一定的治疗效果。ACROBiosystems开发的SARS-CoV-2抑制性筛选试剂盒能够帮助客户快速的进行筛选和验证药物,可以有效的提高研发效率。
产品列表
货号 产品详情 检测范围
(μg/mL)
规格 & 价格
EP-105 SARS-CoV-2 Inhibitor screening Kit 20 - 0.039 96tests / ¥6000
480tests / ¥21500

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产品优势
高通量
  1. > 96tests和480tests两种包装规格,可高通量、快速地筛选抑制剂
高通用性
  1. > 可用于筛选更多种属的抗体与小分子化合物抑制剂,且检测不受影响
高重现性
  1. > 试剂盒经过严格质控,批间差异小
方便快捷
  1. > 提供生物素标记ACE2蛋白,简化实验程序,提高了检测效率
阳性对照抑制剂
  1. > 提供验证过的阳性对照抑制剂供参考
真核表达
  1. > 试剂盒组分蛋白均由HEK293细胞表达,赋予其结合活性可靠的翻译后修饰
实验原理
竞争ELISA法
Fig.1. SARS-CoV-2抑制剂筛选试剂盒原理

SARS-CoV-2抑制剂筛选试剂盒检测步骤分为四步:
a. 用SARS-CoV-2 S RBD蛋白包板; b. 将50μL生物素标记human ACE2蛋白加入包被的板中;
c. 添加试剂盒中参考阳性对照抑制剂或您即将要筛选的抑制剂分子; d. 加入HRP标记的链霉亲和素,再加入TMB或其他比色HRP底物。
最后,将通过比较不同实验组之间的OD读数来确定抑制剂对S RBD:ACE2蛋白结合的抑制能力。
实验数据
EP-105验证数据

生物素标记human ACE2与SARS-CoV-2 S RBD蛋白结合实验

固定0.5 μg/mL (100 μL/well)的SARS-CoV-2 S RBD蛋白于板孔中,生物素标记的Human ACE2可以结合S RBD蛋白,线性区间为0.001- 0.06 μg/mL。

抑制剂对ACE2:SARS-CoV-2 S RBD蛋白结合的抑制

梯度稀释的SARS-CoV-2抑制剂(1:2 稀释倍数),从20 μg/mL到0.039 μg/mL (180 nM - 0.35 nM) 加入到ACE2:SARS-CoV-2 S RBD蛋白结合的板孔中,得到抑制性曲线。

抑制剂筛选试剂盒(EP-105)检测不同血清浓度中的mAb

抑制剂筛选试剂盒检测不同浓度血清(0, 10%, 20%, 50%, 100%)中的抗体,5组检测结果的CV值小于30%,说明抑制剂筛选试剂盒能用于血清中抗体的筛选且不受血清的干扰。

>>> ACROBiosystems还开发了高纯度、高活性SARS-CoV-2 S、S1、S RBD、Nucleocapsid、human ACE2蛋白等。蛋白的纯度和结合活性经SEC-MALS、SPR、ELISA、BLI验证,并可免费提供protocol。 点击查看更多信息

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