【ACRO服务】百斯医学病理技术特殊染色服务平台

病理技术是病理学诊断不可分割的一部分,正确的染色结果是病理诊断的重要依据之一。同时，病理染色技术无需复杂的实验条件以及较为昂贵的试剂，操作相对简单，采用染色的方式可以直观清楚地观察到目标组织，在病理学实验中具有重要的应用价值。

HE（苏木素-伊红）染色能较好显示组织结构和细胞形态，主要用于观察和描述正常和病变组织的形态特征，是医学领域中广泛应用的染色方法，也是病理检验中最常用的基本染色方法。习惯上称HE染色为常规染色。但很多情况下HE染色无法满足多种多样的病理学实验需求，研究学者们需要使用多种多样的组织特殊染色方法来进一步佐证自己的实验结果。

特殊染色是指与普通（常规）染色即HE染色相对而言的组织切片染色技术。它主要是利用组织和细胞对染料的亲和力、摄取及丢失速率等物理学特性的差异进行组织染色，从而显示正常和病理的组织与细胞中某些特定成分，如结缔组织、肌肉组织、神经组织、脂质、糖类、蛋白质和核酸、色素、淀粉样物、无机物、神经内分泌细胞胞质颗粒和其他细胞器、病原微生物、血液和淋巴组织以及骨和软骨组织等。

ACRODiagnostics百斯医学依托健全的实验平台及丰富的检测经验，可为您提供从制片到染色再到分析的一站式服务。除常规HE染色外，还可提供一系列特殊染色项目，如Masson染色、PAS染色、AB-PAS染色、维多利亚蓝染色、油红O染色、阿利新蓝染色、碱性磷酸酶染色、瑞氏姬姆萨染色、普鲁士蓝染色等。

糖原PAS染色（苏木素）

PAS染色又称过碘酸雪夫染色，糖原染色。过碘酸能使细胞内的多糖乙二醇基氧化成二醛，再与Schiff氏液的无色品红结合，红色，定位于胞浆上。

PAS染色法在组织学上，主要用来检测组织中的糖类。过碘酸把糖类相邻两个碳上的羟基氧化成醛基，再用Schiff试剂和醛基反应。

糖原染色应用的范围比较广泛，如用以证明与鉴别细胞内空泡状的性质，心肌病变及其他心血管疾病的诊断，糖原累积病诊断和研究，糖尿病的诊断和研究，用于某些肿瘤的诊断等。

样本类型：肝脏、软骨、垂体等包含糖原、中性粘液性物质和淀粉样物质等

样本染色接受标准：

● PAS反应阳性物质呈红色或紫色

● 细胞核呈蓝色

● 细胞质呈深浅不一的红色

阿利新蓝（AB）染色

阿利新蓝是一种类铜钛花青共轭染料，这种阳离子染料与酸性基团结合，也即 阿利新蓝与组织内含有的阴离子基团如羧基和硫酸根形成不溶性复合物。阿利新蓝由中央含铜的酞菁环与四个异硫脲基通过硫醚键相连而成。该异硫脲基呈中度碱性，使阿利新蓝带阳离子。pH值为2.5时组织内的羧基电离，带有一个负电荷，与阿利新蓝中的阳离子形成盐键，是带有羧基的组织（如蛋白多糖/透明质酸以及上皮酸性黏蛋白）染色。可用于进行软骨染色，粘蛋白染色和肠化生程度判定，还可用于粘液性上皮肿瘤的鉴别和肿瘤中是否含有粘液物质的证明。

样本类型：肠组织等含有蛋白多糖/透明质酸以及上皮酸性黏蛋白的组织

样本染色接受标准：

● 硫酸化粘液质（硫酸黏蛋白和唾液黏蛋白）呈蓝色

● 羧酸化粘液质（蛋白多糖，透明质酸）呈蓝色

● 细胞核和嗜碱性物质呈红色或粉红色

刚果红染色（淀粉样物质）

淀粉样物质是一种无固定形状的细胞外嗜酸性物质，可存在于不同的组织、器官，淀粉样蛋白沉积于组织或器官引起的慢性代谢性疾病，可侵犯全身多种器官，导致的疾病称为淀粉样变。

刚果红染色是在鉴别淀粉样变及其分型中发挥着其他染色所难以替代的作用。淀粉样物质对刚Chemicalbook果红有选择性亲和力，刚果红是双偶氮染料，它以染料分子上的氨基与淀粉样蛋白内多糖分子上的羟基结合，而附着于淀粉样蛋白纤维上而显色。

样本类型：含有淀粉样物质的组织，例如皮肤

样本染色接受标准：

● 淀粉样物质呈红色

● 细胞核呈蓝色

甲苯胺蓝染色

甲苯胺蓝是常用的人工合成染料的一种，属于醌亚胺染料类，这类染料一般含有两个发色团，一个是胺基，一个是醌型苯环，来构成色原显色。染料除有发色团外，还要有能使色原对组织及其他被染物产生亲和力的原子团即助色。助色团能促使染料产生电离成盐类，帮助发色团对组织产生染色力，使切片上的组织细胞着色。甲苯胺蓝不仅含有两个发色团，还含有两个助色团，为碱性染料，甲苯胺蓝中的阳离子有染色作用，组织细胞的酸性物质与其中的阳离子相结合而被染色。

样本类型：肺脏、骨组织等含有肥大细胞、淋巴细胞等

样本染色接受标准：

● 细胞核、淋巴细胞胞质呈深蓝色

● 肥大细胞颗粒、淋巴细胞核仁呈紫红色

● 细胞质、单核细胞呈淡蓝色

Masson染色

Masson染色原理与阴离子染料分子的大小和组织的渗透有关,分子的大小由分子量来体现,小分子量易穿透结构致密、渗透性低的组织;而大分子量则只能进入结构疏松的、渗透性高的组织。根据组织不同的渗透性能,选择分子大小不同的阴离子的染料进行染色,便可把不同组织成份显示出来。

样本类型：肠组织等含有胶原纤维的组织

样本染色接受标准：

● 胶原纤维呈蓝色（复染）

● 胞质、肌纤维和红细胞呈红色

● 胞核呈蓝褐色

抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色

抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）为破骨细胞的特异性标志酶，对骨组织进行抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）染色可以了解破骨细胞的骨吸收情况。

TRAP 染色实验的基本原理是应用偶氮耦联免疫组化分析法，抗酒石酸酸性磷酸酶酶活性部位显示红色反应。使用试剂盒，以萘酚二磷酸盐为底物，偶氮副品红为显色剂，TRAP 在酒石酸钾钠存在条件下可将萘酚 AS-BI 磷酸盐水解为萘酚 AS-BI，与显色剂结合形成红色沉淀。

样本类型：肺组织或骨组织等含有抗酒石酸酸性磷酸酶的组织

样本染色接受标准：

● 阳性颗粒呈紫红色

● 细胞核呈绿色

网状纤维染色(改良Gordon-Sweets法)

网状纤维(Reticular fiber)是网状结缔组织内的一种纤维，由网状细胞所产生，直径多在0.2～1.0μm，有韧性而没有弹性，网状纤维染色的原理是利用氨银液被组织吸咐与组织中的蛋白结合，经甲醛还原成黑色或棕黑色的金属银沉积于组织内及其表面。用氯化金调色后，再用硫代硫酸钠液洗去未还原的银盐，从而将组织内的网状纤维清晰地显示出来。

样本类型：肾组织等含有网状纤维的组织

样本染色接受标准：

● 网状纤维呈黑色

● 胶原纤维呈黄色至黄棕色

● 细胞核呈红色

● 细胞质呈淡黄色

Mallory酸性苏木素染色

磷钨酸是电子致密的物质，在电子下是不透明的。在透射电子显微镜中，可以用磷钨酸来针对病毒、神经、多糖及其他生物组织进行负染色。磷钨酸苏木素染色液常用于平滑肌的染色，尤其多用于显示横纹肌的横纹。临床上应用该方法对横纹肌肉瘤进行诊断，横纹肌肉瘤的组织学形态变化多样，与未分化的间胚叶肿瘤很难鉴别，采用磷钨酸苏木素染色，在瘤细胞质内发现蓝色横纹，则可以证明该肿瘤是呈横纹肌分化。该染色液也可以对炎症渗出的纤维素，DIC的毛细血管中的纤维素、以及神经病理等方面进行染色。

样本类型：肌肉，心脏等含有横纹肌，胶原纤维，弹性纤维的组织

样本染色接受标准：

● 横纹肌呈蓝色

● 胶原纤维、软骨基质呈棕红色

● 粗的弹性纤维呈紫色

荧光桃红B染色

偶氮荧光桃红法（肌纤维染色）其染色原理在于鞣酸容易进入渗透性强的胶原纤维，胶原纤维呈黄色；偶氮荧光桃红容易进入渗透性较低的肌纤维，肌纤维呈红色。偶氮荧光桃红染色液用于区分肌纤维和胶原纤维，对比清晰，不宜褪色，同时可以显示肌上皮细胞，可用于乳腺和皮肤等肌上皮细胞瘤的诊断。

样本类型：肌肉，肌腱、心脏等含有肌纤维的组织

样本染色接受标准：

● 肌纤维、肌上皮细胞呈红色

● 结缔组织呈黄色

● 细胞核呈蓝色

维多利亚蓝弹力纤维染色

弹性纤维又称弹力纤维，主要由弹性蛋白构成。它广泛分布于全身的各个部位，尤以循环系统，呼吸系统和皮肤系统。在HE染色的标本上，含量少时不易与胶原纤维区别，含量多时呈折光性强的淡粉红色。

维多利亚蓝(Victoria BlueVB)的主要成分为含有丰富的二硫键(R-S-S-R)的糖蛋白,强嗜酸性易于染色液中的碱基结合,特异性着色弹力纤维,胶原纤维一般不着色.常用于心内膜弹性纤维异常增殖和高血压小动脉壁增厚等显示。

维多利亚蓝染色法可以清晰的显示组织形态以及细胞结构，在淡粉色的背景下，蓝色的弹力纤维对比度更强，且易与黑色的碳墨颗粒相鉴别。

样本类型：肺脏、心脏、肝脏等含有弹性纤维的组织

样本染色接受标准：

● 弹力纤维呈蓝色

● 细胞核呈红色

亚甲基蓝染色

亚甲基蓝，又称美蓝、次甲基蓝、次甲蓝等，是一种活体染色剂,是碱性染料,呈蓝色粉末状,能溶于水和酒精，而染色体容易被碱性染料染色。亚甲基蓝的染色原理是利用亚甲基蓝分子与细胞或分子中的DNA结合，从而使细胞核呈蓝色。

样本类型：组织细胞

样本染色接受标准：

● 组织或细胞呈蓝色

尼氏染色(甲基紫法)

神经元细胞体包括一个具有皱褶核膜的大细胞核、稀疏的染色质和一个明显的核仁。在细胞体中细胞质是尼氏颗粒，即能够代表粗面内质网并在很多神经元中产生特异的斑点状嗜碱性表现的嗜碱性颗粒。

尼氏体也存在于树突中，但不在于轴突和胞体的轴丘。尼氏体会因为生理状态的变化而变化，尼氏体是神经元内蛋白质合成的重要部位，当神经元受到刺激后，胞体内的尼氏体会明显减少。

尼式染色是利用了DNA、RNA酸性的特征，用碱性的染料(比如，甲酚紫、甲苯胺蓝)去绑定DNA和RNA，从而将细胞着色。尼氏染色的部位主要是DNA聚集的细胞核，内质网，特别是粗面内质网，其上的核糖体包含的核糖体RNA占细胞RNA总量的80%以上。粗面内质网也因为是尼氏染色显著的染色位点而被称为尼氏体。

样本类型：脑等包含神经细胞的组织

样本染色接受标准：

● 尼氏小体呈紫黑蓝色

● 神经元呈淡紫蓝色

● 细胞核呈紫蓝色

ALP碱性磷酸酶染色

碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase，简称ALP或AKP)为一类磷酸酯酶，广泛分布于哺乳动物组织内，其活性所需最适pH9.2~9.8，此酶主要存在于物质交换活跃之处(细胞膜)，如肠上皮和肾近曲小管的刷状缘、附睾上皮之静纤毛、肝的毛细胆管膜以及微动脉和毛细血管动脉部之内皮，还见于内质网、高尔基复合体、吞饮小泡、肠上皮之溶酶体、中性粒细胞之中性颗粒以及平滑肌之细胞膜。

碱性磷酸酶染色试剂盒(改良Gomori钙钴法)使用金属沉淀法来显示碱性磷酸酶活性，有级联放大效应，可定性或半定量检测冰冻和石蜡切片中的碱性磷酸酶分布。天然存在的β-甘油磷酸钠为底物，在pH9.4～9.6的条件下将基质液中的α-磷酸萘酚钠水解释放出磷酸，立即被金属离子捕获转为沉淀，再依次被置换为棕黑色稳定附着色淀，定位于酶活性所在之处。

样本类型：如肠上皮和肾近曲小管的刷状缘、附睾上皮纤毛、肝的毛细胆管膜以及微动脉和毛细血管动脉部内皮等

样本染色接受标准：

● 阳性部位呈黑色沉淀

铜盐染色(红氨酸法)

铜在人体内含量极少，采用一般的组织学方法检测不到。肝脏中的铜较多，当肝豆状核变性或肝硬化时，铜含量明显增加。红氨酸法原理在于红氨酸与铜盐反应生成红氨酸-二亚胺(二硫乙二胺红氨酸)型铜盐沉淀，呈黑绿色。

样本类型：肝脏等含有铜或铜盐的组织

样本染色接受标准：

● 铜盐呈淡绿色至绿色

● 细胞核呈淡红色

AB-PAS染色

阿利新蓝（又称阿尔辛蓝，AB）和过碘酸雪夫（PAS）技术联合使用可鉴别同一组织中的中性黏蛋白和酸性黏蛋白。爱先蓝是显示酸性粘液物质最特异的染料，这种阳离子染料与酸性基团形成盐键，也即阿利新蓝与组织内含有的阴离子基团如羧基和硫酸根形成不溶性复合物。分子中带正电荷的盐键与酸性黏蛋白多糖物质中带负电荷的酸性基团结合形成不溶性的复合物而呈蓝色，再于PAS进行复合染色，就能显示三种不同黏液物质成分。

样本类型：消化道等包含中性黏蛋白和酸性黏蛋白的组织

样本染色接受标准：

● 糖原、蛋白呈紫红色

● 酸性黏蛋白呈蓝色

● 蛋白多糖和透明质酸呈蓝色 

feulgen 福尔根染色

Feulgen（福尔根核酸）染色原理在于DNA经温和的弱酸(例如盐酸)水解后，嘌呤碱与脱氧核糖间的糖苷键被打开，并且使脱氧核糖与磷酸间的磷酯键断开，在脱氧核糖的一端形成游离的醛基。醛基在原位与Schiff试剂结合，形成紫红色化合物，使细胞内含有DNA的部位呈紫红色。紫红色的产生是因为反应产物的分子内有醌基，醌基是一个具有颜色的发色团，所以凡含有DNA的部位就呈紫红色。

样本类型：脱氧核糖核酸(DNA)染色

样本染色接受标准：

● 细胞核内DNA呈红紫色

点击了解更多病理技术平台