“膜杰作”全长多次跨膜蛋白

跨膜蛋白是一类嵌入细胞膜磷脂双分子层、实现胞内外跨膜运输的蛋白质。其跨膜区域的相互作用是连接膜外环境与细胞内环境的重要渠道,以此来执行各种激活和应答反应实现信号转导,进而调控细胞在形态和功能上的动态变化。许多人类疾病或许都与异常的跨膜蛋白功能有关,跨膜蛋白的多功能性使其成为理想的药物作用靶点。
具有全长完整结构的多次跨膜蛋白具有重要意义,以CD20为例,已有研究证实Rituximab对CD20的识别不止有一级表位ECL2,还识别其二级表位ECL1/ECL2,二级表位ECL1/ECL2还会影响Rituximab的CDC效应。然而,多次跨膜蛋白结构复杂,具有多个疏水跨膜区,往往在宿主细胞中表达水平极低。
针对多次跨膜蛋白的下游应用,ACROBiosystems百普赛斯构建了专业的“膜杰作”解决方案,包括VLPDetergentNanodiscNanodisc-pro四大技术平台,可满足膜蛋白在药物筛选、抗体开发及功能研究等不同应用场景的需求。

“膜杰作”热门产品推荐

基于不同应用场景的“膜杰作”技术平台推荐

免疫
首选:
抗体筛选
备选:
ELISA
首选:
FACS
首选:
备选:
SPR/BLI
首选:
“膜杰作”四大技术平台关键特性对比
“膜杰作”四大技术平台关键特性对比
“膜杰作”应用场景及对应平台推荐
“膜杰作”应用场景及对应平台推荐

“膜杰作”四大技术平台

VLP技术平台
VLP技术平台

通过在哺乳动物细胞中共表达目标膜蛋白与病毒结构蛋白,可在病毒样颗粒(VLP)出芽过程中将膜蛋白天然嵌入脂双层。该方法能够保留膜蛋白的天然构象、翻译后修饰及正确的膜朝向,并提供完全不含去垢剂的微环境。得益于其重复的多价展示与强免疫原性,基于VLP的膜蛋白产品适用于免疫、抗体发现与筛选中的结合分析(如ELISA)及基于细胞的检测(如FACS)等应用场景。

Detergent技术平台
Detergent技术平台

通过温和去垢剂胶束提取、专业增溶处理及严格亲和纯化,该工艺可在下游流程中最大限度保留全长跨膜蛋白的天然跨膜构象。所获得的去垢剂增溶膜蛋白具有高纯度、准确定量及良好的生物活性保持率,且不含无关膜杂质与外源支架蛋白,适用于免疫、抗体发现与筛选中的结合分析(如ELISA)以及亲和力测定(如SPR和BLI)等应用场景。

Nanodisc技术平台
Nanodisc技术平台

将纯化后的Detergent膜蛋白通过自组装过程,重新组装至由MSP1D1膜支架蛋白稳定的合成磷脂双分子层中,同时彻底去除去垢剂,从而构建一个稳定且完全不含去垢剂的环境,完整保留膜蛋白的天然构象与生物活性。该方法所得产物具有极佳的均一性,且与基于细胞的检测(如FACS)以及抗体发现与筛选中的结合分析(如ELISA)高度兼容。

Nanodisc-pro技术平台
Nanodisc-pro技术平台

通过温和、非破坏性的提取方法,在不破坏或扰动天然膜结构的前提下,直接从细胞膜中分离出全长跨膜蛋白及其周围的天然磷脂环境。该方法完整保留了膜蛋白的天然构象与原始脂质环境,形成由细胞膜磷脂组成的稳定纳米盘,未使用去垢剂进行膜蛋白的提取和溶解,未破坏细胞膜结构,从而确保生物活性的完好保持。所获得的产物适用于基于细胞的检测(如FACS)以及抗体发现与筛选中的结合分析(如ELISA)等应用场景。

“膜杰作”全维度数据展示

  • 免疫
  • ELISA
  • SPR
  • FACS

免疫

Claudin 18.2 VLP的免疫效果
Claudin 18.2 VLP的免疫效果

免疫原:Claudin 18.2 VLP (Cat. No. CL2-H52P7)
方案1(红线):用VLP骨架 (Cat. No. VLP-N5213) 筛选,表征血清中抗VLP骨架的抗体滴度。
方案2(黑线):用Claudin-18.2 VLP (Cat. No. CL2-H52P7) 筛选,表征血清中抗Claudin-18.2以及抗VLP骨架的抗体滴度。
方案3(蓝线):用Claudin-18.2 Detergent(DDM) (Cat. No. CL2-H5587) 筛选,表征血清中抗Claudin-18.2的抗体滴度。

Claudin 18.2 DDM的免疫效果
Claudin 18.2 DDM的免疫效果

免疫原:Claudin 18.2 Detergent (DDM) (Cat. No. CL2-H5587)
方案1(红线):用Claudin-18.2 VLP (Cat. No. CL2-H52P7) 筛选,表征血清中抗Claudin-18.2 以及抗VLP骨架的抗体滴度。
方案2(黑线):用Claudin-18.2 Detergent(DDM) (Cat. No. CL2-H5587) 筛选,表征血清中抗Claudin-18.2的抗体滴度。

Claudin 18.2 Nanodisc-pro的免疫效果
Claudin 18.2 Nanodisc-pro的免疫效果

免疫原:Claudin 18.2 Nanodisc-pro (Cat. No. CL2-H5589)
方案1(黑线):用Claudin-18.2 Nanodisc-pro (Cat. No. CL2-H5589) 筛选,表征血清中抗Claudin-18.2以及抗Nanodisc-pro骨架的抗体滴度。
方案2(红线):用Claudin-18.2 VLP (Cat. No. CL2-H52P7) 筛选,表征血清中抗Claudin-18.2 以及抗VLP骨架的抗体滴度。
方案3(蓝线):用Nanodisc-pro (Cat. No. APO-H5143)骨架筛选,表征血清中抗Nanodisc-pro骨架的抗体滴度。

流式细胞术检测得到抗体的活性
流式细胞术检测得到抗体的活性

抗体对靶细胞 (Claudin-18.2) 的特异性结合。 与同型对照(Isotype control, 黑线)相比,Anti-Human Claudin 18.2 抗体(红线)在表达 Claudin-18.2 的靶细胞上产生了显著的荧光信号右移,表明具有良好的结合活性。

流式细胞术检测得到抗体的活性

抗体对阴性对照细胞 (Claudin-18.1 ) 的交叉反应性检测。 该抗体(红线)在表达 Claudin-18.1 的阴性对照细胞上,其信号峰与同型对照(黑线)重叠,表明抗体特异性强,无明显的同族蛋白交叉反应。

流式细胞术检测得到抗体的活性

抗体对宿主细胞 (HEK 293) 的背景结合检测。 该抗体(红线)与同型对照(黑线)在HEK 293空白宿主细胞上的信号峰完全重叠,表明抗体对背景细胞无非特异性结合。

产品列表

VLP平台
Detergent平台
Nanodisc平台
Nanodisc-pro平台
稳定细胞株
膜蛋白抗体

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