【前沿进展】靶向CD20、CD3——抗体药物研发的见证者，也是缔造者

屡传捷报的CD20和CD3两个靶点，可谓见证了整个抗体药物研发的历程。

早在19世纪中叶，人们发现在某些疾病感染者血清中存在能够治疗相关疾病的“杀菌素”，成为了人们对于抗体的初步认知。而从“杀菌素”到抗体的模型的提出，又经历了近一个世纪。说到真正的治疗性抗体药物的研发，则要追溯到上个世纪70年代，Milstein和Kohler尝试将能够产生抗体的B细胞与肿瘤细胞进行了融合，制备出了既能够分泌抗体，又能够无限增殖的杂交瘤细胞。这项技术，对于治疗性抗体药物的研发具有里程碑的意义，Milstein和Kohler也因此获得1984年的诺贝尔生理学或医学奖。

在杂交瘤技术获得诺贝尔奖的第二年，首个治疗用抗体药物Orthoclone OKT3获得了美国FDA的批准，这是一个靶向CD3的抗体，被用于防止肾脏移植后的排异反应。Orthoclone OKT3作为第一个获批的治疗用抗体药物具有划时代的意义，然而，由于其序列来源为鼠源，使得在给药过程中被人体免疫系统当作外源蛋白识别并清除，使得多次给药后的治疗效果下降明显，甚至可能诱发严重的机体免疫相关副反应，甚至致死。这些不良事件的出现给治疗用抗体药物的研发蒙上了一层阴影。

在此基础上，将来自于鼠源的可变区与人源的恒定区进行嵌合，制备出既能够识别靶点蛋白，又降低鼠源序列占比的嵌合抗体，初步降低了异源序列导致的排斥反应。嵌合抗体中的代表作，是罗氏于1997年获批的靶向CD20的用于治疗B细胞淋巴瘤的Rituxan单抗。

伴随着抗体药物研发的不断进展，后续通过抗体人源化改造获得的人源化抗体，以及通过转基因动物或噬菌体/酵母展示技术获得的全人源抗体相关技术路线逐渐成熟，使得抗体药物研发呈现出爆炸式的飞跃。

作为B细胞表面抗原，CD20表达开始的稍晚一些，丢失的稍早一些，在前B细胞到成熟B细胞阶段均有表达，而不表达在祖B细胞以及成熟的浆细胞上。CD20同时表达于B细胞来源的淋巴瘤、白血病等肿瘤细胞，涉及炎症和免疫相关疾病的B细胞，因而CD20也成为了淋巴瘤、白血病和某些自身免疫疾病的治疗靶标。

抗CD20抗体的作用机制

靶向CD20的抗体药物经历了三代创新：第一代是以Rituximab(利妥昔单抗)为代表的人鼠嵌合抗体，人源化程度不高，部分患者会产生耐药或者不良反应；第二代是以Ofatumumab(奥法木单抗)为代表的人源化改造抗体，虽然降低了免疫原性，减少了不良反应，但抗体特异性和抗原结合的亲和力有一定的下降；第三代是以Obinutuzumab(奥妥珠单抗)为代表的Fc片段糖基化修饰抗体，增强抗体的特异性及与抗原结合的亲和力，使得ADCC与ADCP效应增强。但临床数据表明，尽管抗CD20单抗已经发展到了第三代，利妥昔的领先地位并没有被撼动。

目前在CD20XCD3的双抗研发领域中，丹麦公司Genmab开发的Epcoritamab(GEN3013)是一种皮下注射的双特异性抗体，目前正在研究用于治疗B细胞非霍奇金淋巴瘤。罗氏布局了两种同时靶向CD20/CD3的不同结构形式的双特异性抗体：Mosunetuzumab和Glofitamab。2020年的美国血液制品年会上，罗氏披露了该药物的临床实验结果：在接受Mosunetuzumab联合CHOP治疗复发/难治性非霍奇金淋巴瘤的患者中总体有效率达到了86%，其中71%的患者达到了完全缓解。目前Mosunetuzumab的相关临床研究覆盖了诸如弥漫性大B细胞淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤、滤泡性淋巴瘤等多个适应症。

Glofitamab的结构和作用机理

2019年的美国血液制品年会上，罗氏就公布了Glofitamab联合第三代CD20单抗——奥妥珠治疗复发/难治性非霍奇金淋巴瘤的临床试验进展数据：联合治疗的客观缓解率(ORR)为54% (n=15/28)，完全缓解率(CR)为46% (n=13/28)。

2018年底，随着罗氏的利妥昔单抗的核心专利的到期，国内各大药企纷纷加入利妥昔单抗生物类似药研发的热潮。2019年初，复宏汉霖率先递交了利妥昔单抗注射液的上市申请，并成功获批。随后，由信达和礼来共同研发的利妥昔单抗注射液也成功获批上市。与此同时，国内申报CD20单抗的企业，还有海正药业，正大天晴，丽珠集团，华兰生物，嘉和生物，苏州金盟（信立泰子公司）等。

CD20带来的巨大市场，使各大药企纷纷加入战场，但随着医保的纳入，CD20单抗最新中标价格仅为原研药的39%，为避免过度竞争，实现产品差异化，药企们纷纷转战双抗的研发，掀起了CD20/CD3双抗研发的新热潮。国内在CD20/CD3双特异性抗体的赛道上，有再鼎医药与再生元合作开发的Odronextamab（REGN1979）、诺诚健华和康诺亚联合开发的CM355、嘉和生物开发的GB261（通过降低CD3的亲和力来降低免疫相关副反应发生率）、爱思迈生物的EX103。