【前沿进展】Tifcemalimab曙光初现，BTLA另辟蹊径突破PD-1内卷化

B /T 淋巴细胞衰减因子（B and T lymphocyte attenuator，BTLA）于2003年在活化的Th1细胞（辅助性T细胞1型）上首次被发现，同时也被证明在B细胞、巨噬细胞、树突状细胞和NK细胞上表达。BTLA是免疫调控中重要的共信号分子之一，属于CD28家族，其结构和功能与PD-1和CTLA-4相似，它具有细胞外免疫球蛋白结构域、免疫受体酪氨酸抑制基序（ITIM）以及免疫受体基于酪氨酸的开关基序（ITSM）。BTLA信号转导包括ITIMs的磷酸化和含有SH2结构域的磷酸酶1（SHP-1）/SHP-2结合，从而抑制T细胞增殖和细胞因子的产生。

HVEM（TNFRSF14、CD270）是已发现的BTLA的唯一配体，是肿瘤坏死因子受体超家族成员之一。与BTLA相似，HVEM同样广泛地表达于人体免疫细胞，如树突状细胞、初始 T 细胞和 B 细胞、NK 细胞、单核细胞和中性粒细胞，HVEM也在多种肿瘤细胞表面表达，包括非小细胞肺癌、黑色素瘤、结直肠癌和淋巴瘤，在T细胞增殖、肿瘤免疫、移植免疫、炎症反应和自身免疫性疾病发生过程中起重要的生物学作用。

在正常生理情况下，BTLA与其配体HVEM结合后，它产生抑制性信号并抑制T细胞的激活，防止免疫系统对自身的损伤。因此，BTLA-HVEM在肿瘤中发挥了促进肿瘤免疫逃逸的作用。

如上所述，HVEM在一些肿瘤中过表达，并且显示肿瘤浸润T细胞呈BTLA阳性。研究显示，较高的BTLA表达与较高的HVEM表达呈正相关。据报告，BTLA 会在从黑色素瘤患者外周血中分离的 CD8+ T 细胞上表达，并与 HVEM 交联可抑制 T 细胞扩增和 IFN‐γ 产生，此外CD8+ T 细胞上的 BTLA 上调会导致细胞功能障碍，并且阻断 BTLA 至少可部分恢复 CD8+ T 细胞增殖和细胞因子产生。

虽然BTLA仅有HVEM这一个配体，但是HVEM却有多个配体。研究发现，HVEM可与不同配体结合能够产生相反的作用。其与BTLA结合是产生免疫抑制效应，负性调节淋巴细胞的活化与增殖。而与LIGHT或LT-α结合却可以刺激T细胞和B细胞的增殖与活化，具有诱导炎症反应和为T细胞活化提供第二刺激信号的作用。

因此，BTLA靶点抑制剂在解除BTLA／HVEM信号通路的同时，还可能促进HVEM和LIGHT等配体的结合，激活Ｔ细胞，具有双重抗肿瘤作用机制。

此外，研究表明，BTLA还与其他共抑制受体表达相关。在晚期黑色素瘤中，Fourcade等人证明42%的NY-ESO-1特异性CD8+T淋巴细胞共同表达BTLA和PD-1，这些细胞具有部分功能失调表型。当NY-ESO-1特异性CD8+T淋巴细胞受到同源抗原的长时间刺激时，TIM-3和PD-1上调。BTLA表达遵循不同的模式，这表明BTLA上调取决于不同的条件，而不是由高抗原负载驱动的功能耗竭。此外，抗BTLA抗体阻断BTLA可增强NY-ESO-1特异性CD8+T细胞产生IFN-γ、TNFα和IL-2。研究表明，当抗BTLA与抗PD-1联合时，在功能分析中观察到协同效应。

上述研究表明BTLA与PD-1的表达相关。BTLA触发的抑制被阻断可以进一步改善肿瘤浸润淋巴细胞功能，联合阻断BTLA和PD-1显示出显著的协同效应。BTLA 成为下一代颇具潜力的癌症免疫治疗靶点。

尽管BTLA显示出不俗的潜力，但目前靶向BTLA的在研药物并不多，国内仅君实生物迈入临床。目前处于晚期肺癌的I/II期临床试验中。其他在研单抗还包括HiFiBiO公司的HFB-200603等。靶向BTLA的药物进展如下：

靶向BTLA研发进展（数据来源于informa）

Tifcemalimab（TAB004/JS004）是君实生物自主研发的全球首个进入临床开发阶段（first-in-human）的抗BTLA  IgG4单克隆抗体，通过结合BTLA，阻断HVEM-BTLA的相互作用，从而阻断BTLA介导的抑制性信号通路，最终达到激活肿瘤特异淋巴细胞的作用。

今年ASCO年会上，君实生物首次展示了Tifcemalimab用于淋巴瘤与实体瘤治疗的早期临床成果，成为BTLA靶点药物在肿瘤领域重要的里程碑事件。本次在ASH年会上公布的是其淋巴瘤研究的更新结果。

ANB032是AnaptysBio公司开发的一款BTLA抗体，可以通过调节BTLA与HVEM的结合来沉默促炎信号，广泛适用于与淋巴和骨髓免疫细胞失调相关的人类炎症性疾病。目前，处于临床前研发阶段。

ANB032作用原理（数据来源于AnaptysBio官网）

HFB200603是通过HiFiBiO（高诚生物）单细胞平台筛选的能与人类及食蟹猴BTLA结合的抗体，它能够阻断BTLA与它的配体HVEM的相互作用，解除经HVEM介导的免疫抑制效果，和促使在不同类型人类肿瘤的肿瘤微环境中炎性细胞因子的产生。HFB200603可以协同抗PD-1抗体来增强IFN-γ 的产生并显示了良好的可开发性、药物动力学及安全特征。

2022年11月，高诚生物宣布了与诺华公司达成的第二项临床试验供应合作协议，以评估高诚生物新型抗BTLA单克隆抗体HFB200603与诺华抗PD-1免疫检查点抑制剂Tislelizumab (替雷利珠单抗)的联合使用对于通过高诚生物专有的药物智能科学DISTM平台预选定的晚期实体瘤适应症的潜在治疗效果。

The purity of Human BTLA (31-150), His Tag (Cat. No. BTA-H52H3) is more than 85% and the molecular weight of this protein is around 19-29 kDa verified by SEC-MALS.

Immobilized Human HVEM, Mouse IgG2a Fc Tag, low endotoxin (Cat. No. HVM-H5255) at 5 μg/mL (100 μL/well) can bind Biotinylated Human BTLA (31-150), His,Avitag (Cat. No. BTA-H82E6) with a linear range of 0.156-2.5 μg/mL (QC tested).

Protocol

✍ 受体配体亲和力经BLI验证

Loaded Human BTLA (31-150), His Tag (Cat. No. BTA-H52H3) on NTA Biosensor, can Human HVEM, Mouse IgG2a Fc Tag, low endotoxin (Cat. No. HVM-H5255) with an affinity constant of 20.8 nM as determined in BLI assay (ForteBio Octet Red96e) (Routinely tested).

Protocol