流感病毒属于正粘病毒科的RNA病毒，分为甲型、乙型、丙型流感病毒三类，据全球世界卫生组织（WHO）数据统计，季节性流感每年会导致全球范围内约10亿例感染病例，其中包括300~500万例重症病例和29~65万例呼吸道死亡。

流感病毒的分类

疫苗是预防和控制流感的主要措施之一，目前已上市的流感疫苗包括全病毒灭活疫苗、减毒活疫苗、重组蛋白疫苗、裂解疫苗、亚单位疫苗5种类型，新一代疫苗研发技术正逐步被用于流感疫苗的研发，包括病毒样颗粒（VLP）疫苗、多肽疫苗、病毒载体疫苗和核酸疫苗。

开发基于HA的流感疫苗的策略 ^[1]

血凝素（Hemagglutinin，HA）是流感病毒包膜表面含量最多的糖蛋白，在病毒侵袭和感染过程中起关键作用，天然以三聚体(Trimer)的形式存在于双层类脂膜上，每个HA单体又由球状头部和杆状茎部两部分组成：球状头部由HA1组成，负责病毒与宿主细胞表面唾液酸受体的结合，将病毒吸附到宿主细胞表面；杆状茎部由HA2和部分HA1组成，并锚定在病毒衣壳的脂质双层中，HA2主要介导病毒包膜与宿主细胞膜的融合。病毒通过内吞作用进入宿主细胞后，在低pH诱导下，实现由膜融合前状态（pre-fusion）到膜融合后状态（post-fusion）的转变，从而完成病毒与宿主细胞膜的融合。

HA头部含有抗原决定簇和受体结合位点，是疫苗开发的重要靶抗原，目前的季节性疫苗也主要触发针对HA头部结构域的抗体；然而，该位点容易发生抗原漂移和转化，导致疫苗保护有限。高度保守的HA茎产生保护性抗体，在不抑制血凝作用的情况下中和病毒感染性，是开发通用流感疫苗更具吸引力的目标。许多研究表明，该位点含有许多结合广谱中和抗体（bnAbs）的抗原表位，并且在抑制病毒进入细胞中具有重要作用。

HA2区是通用流感疫苗的潜在研究靶点，但由于HA茎的抗原表位经常被其头部阻断，疫苗设计需要增加HA茎对宿主免疫系统的暴露，例如通过使用茎结构域中的某些短肽表位与载体蛋白结合以增加HA茎的免疫暴露和帮助抗原呈递到茎的结构域，从而增强免疫作用。

NA特异性抗体抑制神经氨酸酶（NA）的机制 ^[2]

神经氨酸酶（Neuraminidase，NA）是流感病毒包膜表面含量仅次于HA的糖蛋白，主要通过切割宿主细胞膜上的病毒唾液酸受体来促进病毒颗粒的释放并防止后代病毒在细胞表面的积累，从而在病毒传播中起重要作用。NA从N端到C端可分为四个主要区域：细胞质区、跨膜区、茎区和头部区。

目前季节性流感疫苗主要靶向HA，然而，美国疾控中心数据显示，最近10年流感疫苗在北美的平均保护率只有40%，研究表明^[2]，流感疫苗由于缺少NA的有效表位，所以疫苗接种人群中很难诱导出有效的NA特异性的体液免疫应答，相反，流感病毒自然感染患者却能诱导高比例的NA的抗体应答。这些抗体在体外实验中不仅显示出广谱与高效的抗病毒活性，还具有抑制“达菲”耐药流感病毒株感染复制的能力。进一步研究证实，NA抗体不止能分别保护小鼠免受10倍致死剂量的季节性流感毒株H1N1与H3N2的感染，还能抵制禽流感H5N1的致命感染。可见，NA是未来的新型通用型流感疫苗研究极具潜力的重要靶点。

除HA和NA外，流感病毒基质蛋白2的细胞膜外区（M2e）和核蛋白（NP）因其在任何亚型的人类流行性病毒株中均高度保守，被提出可作为通用疫苗设计的候选免疫原。

国内2022-2023年度国内签批发的流感疫苗厂商及疫苗类型

国外进入临床试验的通用流感疫苗

为支持流感疫苗的研究开发，ACROBiosystems特开发了流感病毒不同亚型的HA及NA靶点蛋白，可用于各种类型流感疫苗的开发与质量控制阶段，力求加快其研究进程。

● 覆盖2022-2024年流行毒株及H5Nx多亚型；

● 提供HA天然三聚体构象蛋白、NA四聚体构象蛋白等不同疫苗研发所需抗原；

● His、His & Avi等不同标签可供选择，满足不同实验设计需求；

● HA纯度经SDS-PAGE及MALS验证，大于90%；生物活性经抗体结合实验验证。

ACROBiosystems密切关注着多种病毒、传染性疾病的发展态势，陆续研发了多种包膜病毒和非包膜病毒的报告基因假病毒，并基于报告基因假病毒产品，推出假病毒研究相关技术服务，为传染病药物研发领域客户提供抗体及其他抗病毒药物的筛选和评价、中和抗体检测以及疫苗效价评估，助力疫苗、诊断及治疗性药物的开发。

参考文献

[1] Li J, Zhang Y, Zhang X, Liu L. Influenza and Universal Vaccine Research in China. Viruses. 2022 Dec 30;15(1):116. doi: 10.3390/v15010116. PMID: 36680158; PMCID: PMC9861666.

[2] Piepenbrink M S , Nogales A , Basu M ,et al.Broad and Protective Influenza B Virus Neuraminidase Antibodies in Humans after Vaccination and their Clonal Persistence as Plasma Cells[J].Mbio, 2019, 10(2).DOI:10.1128/mBio.00066-19.