Human FcRn Binding Kit (TR-FRET)：全新检测手段，加速您的药物开发

新生儿Fc受体(FcRn)是一种广泛分布于哺乳动物器官、组织和细胞中的MHC I类分子，调节IgG在细胞内和细胞间的转运，在IgG的体内循环、半衰期调节以及免疫应答中起着至关重要的作用，有利于IgG再循环并延长IgG分子(包括致病性IgG自身抗体)的半衰期。然而IgG自身抗体与许多自身免疫性疾病有关，包括重症肌无力(MG)，类风湿性关节炎（RS）、慢性炎性脱髓鞘性多根神经病变（CIDP）等，因此降低血清IgG水平是治疗这些疾病的一种有力的治疗策略。

系统来看，FcRn与IgG之间相互作用是复杂而精细的：

不同亚型IgG分子(IgG1和IgG2)与FcRn结合力不同

相同IgG亚型而Fab结构域不同的分子与FcRn结合力不同

在早期药物研发中，针对IgG抗体和FcRn复杂的相互作用的理解，对于快速、准确地筛选出合适的药物至关重要，尽管这一筛选过程充满了挑战。

TR-FRET，让筛选快人一步

时间分辨荧光共振能量转移（TR-FRET）技术依赖于供体荧光基团和受体荧光基团之间的距离，当供体分子和受体分子彼此靠近时，通过荧光共振能量转移产生信号。

荧光共振能量转移技术（FRET）原理：当供体和受体接近时，产生FRET信号

在TR-FRET实验中，由于所有反应都在同一溶液中进行，无需像传统荧光实验那样进行复杂的样品处理和额外的洗板步骤，这极大地简化了实验流程，降低了操作难度，并减少了因样品处理不当而引入的误差，成为研究蛋白质-蛋白质相互作用、蛋白质-DNA相互作用、酶活性以及药物与靶标结合等生物过程的重要工具。在药物研发领域，TR-FRET技术被广泛应用于高通量筛选、药物动力学研究以及药物与靶标结合亲和力的测定等方面，为新药发现和优化提供了有力支持。

基于TR-FRET技术开发用于检测人血浆/血清中新型冠状病毒抗体的均相血清学检测平台。用BODIPY FL标记识别人IgG的抗体，新型冠状病毒蛋白用CoraFluor-1 (Tb)标记，并与血清混合用于同种型特异性抗体检测

研究人员选择一组阳性反应样本和阴性对照样本(共68份)，并在三天内由三名操作人员进行了测定，操作人员之间的相关性超过99.6%，平均重复性为4.31%，总体精密度为5.72%，远远超过血清学分析的一般期望范围

ACROBiosystems百普赛斯基于TR-FRET技术和IgG抗体竞争性结合FcRn的机制，成功开发出可用于高通量抗体药半衰期筛选的重磅新品：Human FcRn Binding Kit (Cat. No. FRT-01)，简化流程，提高准确性。此外，这款工具特别适合于靶向FcRn以降低致病性自体IgG水平的自身免疫性疾病开发，推动抗体药物研发新进程。

产品优势：

• 性价比更优：量足无忧，充分考虑稀释与移液损失；价格更低；

• 验证数据全面：经多种抗体亚型和抗体药验证；

• 储存运输便利：可长期储存于2-8℃，常温运输；

• 操作简便快捷：无需繁杂的洗板步骤，大幅节省时间；

• 批间一致性高：严格把控原材料、成品质量，稳定供货；

• 结果精准可靠：检测灵敏度高，基质效应弱。

Human FcRn 结合检测试剂盒原理及操作示意图

应用数据展示

The kit has been used to detect different human IgG isoforms of Human IgG1, Human IgG2, Human IgG3, Human IgG4, and modified Human IgG1 Fc (C103S, M135Y, S137T, T139E, H316K, N317F) Protein, His Tag (Cat. No. IG1-H52H8) with different affinities binding to FcRn.

The kit has been used to detect different antibody drug of Bevacizumab, Toripalimab, Eculizumab and Efgartigimodalfa with different affinities binding to FcRn.

Inhibition of Europium-chelate labeled FcRn: FA labeled human IgG antibody binding by Human IgG Premix serial dilutions of Human IgG standard (Catalog # FRT01-C03) (1:4 serial dilution, from 1000 μg/mL to 0.24 μg/mL (6666.67-1.63 nM)) and Human FCRN&B2M Heterodimer Protein Europium-chelate (Catalog # FRT01-C01) and incubate at room temperature (20℃-25℃) for 0.5 hour. Then add FA labeled human IgG antibody (Catalog # FRT01-C02) and incubate at room temperature (20℃-25℃) for 0.5 hour. Detection was performed with IC50 of 20.14 μg/mL.

 Verify potential matrix effects by adding different levels of DEME and FBS to the Sample Diluted buffer. There is no effection in 25% DMEM and 2.5% FBS.

• 试剂盒各组分批间一致性经严格验证，品质稳定

参考文献：

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