自然杀伤(NK)细胞是独特的先天免疫细胞,与T细胞不同,NK细胞通过不依赖于主要组织相容性复合体(MHC)的机制(即直接的细胞毒性机制和免疫调节细胞因子的产生)识别目标细胞,并在不需要致敏的情况下直接杀死这些细胞;同时有研究表明自然杀伤细胞也表现出记忆,类似于适应性免疫系统的细胞。NK细胞来源广泛,各种来源的NK细胞,如诱导多能干细胞(iPSC)、胚胎干细胞(ESC),外周血单核细胞(PBMC)、脐带血(UCB)细胞和NK细胞系,已被用于体外生产NK细胞。PBMC具有相对容易收集、易于体外扩增、无毒副作用等优点,是NK细胞最常见的来源。然而,外周血单核细胞中NK细胞的比例仅为5-15%,临床试验中输注的NK细胞数量范围为5至100×106个细胞/kg,目前的NK细胞体外扩增系统通常需要14至28天才能达到临床剂量所需的数量。基于NK细胞的免疫疗法是治疗多种癌症的有前景的方法,如何在体外获得大量高纯度、高毒性的NK细胞是目前亟待解决的问题。
NK细胞体外活化扩增的关键在于细胞因子组合的选择以及培养基成分的优化等。不同的细胞因子组合、培养基成分均对NK细胞的存活、增殖和功能特性有重要影响,例如,使用无血清培养基可以减少外源物质的引入,降低污染风险。同时,由于供体间的遗传和生物学差异,以及不同供体间PBMC中NK细胞的比例和纯度有所差异,所以在使用NK细胞培养基培养PBMC来源的NK细胞时,需要来自多个供体间的实验结果,以确定培养基的可靠性、稳定性和适用性。
ACROBiosystems百普赛斯基于完善的细胞培养平台、流式细胞术验证平台以及严格的质量管理体系,开发出了高性能的用于NK细胞体外扩增培养的培养基:CelThera™ NK Cell Expansion Medium (Phenol Red-free)。我们比较了四个供者来源的PBMCs在不同的NK培养基中的扩增情况,结果显示,相较于其他商业化培养基,我们的培养基在NK细胞增殖倍率、NK细胞纯度、耗竭标志物TIGIT的比例等多个关键指标上均表现出相当或更优的性能。
此外,ACROBiosystems百普赛斯也开发了一系列用于NK细胞体外培养的GMP级IL-12、IL-18、IL-15、IL-2、IL-21等细胞因子,高活性、高批间一致性,所有GMP级别产品均已通过FDA DMF备案,帮助客户加速生产流程,全面助力NK细胞疗法的开发进程。
PBMC扩增效果
四个供者来源的PBMCs,分别用NK细胞培养基培养两周。细胞扩增结果显示,ACROBio的NK细胞培养基与其他商业化培养基具有可比性,非常值得注意的是,ACROBio的NK细胞培养基展现了更出色的群体细胞增殖倍率。
NK细胞扩增效果
四个供者来源的PBMCs,分别用NK细胞培养基培养两周。细胞扩增结果显示,ACROBio的NK细胞培养基与其他商业化培养基具有可比性,非常值得注意的是,ACROBio的NK细胞培养基展示了更出色的NK细胞增殖倍率。
NK细胞纯度
四个供者来源的PBMCs,分别用NK细胞培养基培养两周。NK细胞纯度结果显示,ACROBio的NK细胞培养基效果更佳。
耗竭标志物TIGIT的比例
四个供者来源的PBMCs,分别用NK细胞培养基培养两周。耗竭标志物TIGIT的比例结果显示,ACROBio的NK细胞培养基耗竭表型与其他商业化培养基趋势相近。
分子 |
货号 |
产品描述 |
IL-12 |
GMP Human IL-12 Protein |
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IL-18 |
GMP Human IL-18 Protein |
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4-1BB Ligand |
GMP Human 4-1BB Ligand Protein |
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IL-15 |
GMP Human IL-15 Protein |
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IL-21 |
GMP Human IL-21 Protein |
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IL-2 |
GMP Human IL-2 Protein |
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Media |
CelThera™ NK Cell Expansion Medium (Phenol Red-free) |
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