靶点特异性磁珠——助力CAR细胞疗法体外分析

在CAR-T治疗实体瘤中，尚未观察到在血液瘤中表现出的同等水平的成功。一个可能的原因是在于大多数实体瘤不表达真正的肿瘤特异性靶抗原，而只是过表达肿瘤相关抗原（TAA），并且TAA在实体瘤中的表达水平往往是异质性的。因此，准确评估CAR-T细胞对表达不同抗原密度的靶细胞的敏感性至关重要。目前，使用转化的靶细胞系可以对CAR-T细胞在抗原密度上的敏感性进行系统研究，可以通过逆转录病毒转导以表达不同水平的抗原，或在本质上表达不同水平所选抗原的各种细胞系中进行筛选。但这种方法非常耗时且昂贵，更重要的是，使用不同遗传背景的各种细胞系使得实验的重复性变得非常困难。

1. 1. 抗原密度与靶细胞数量的非标准化问题

   首先，靶细胞表达的抗原密度往往是不均匀的、不稳定的、难以控制的，很难实现标准化。由于CAR-T细胞的激活在很大程度上取决于肿瘤细胞上靶抗原的表达水平，使用非标准化抗原密度的体外检测具有一定的局限性。其次，靶细胞的数量在检测过程中会发生变化（增殖或死亡），因此很难基于抗原剂量（例如效应物与靶标比率）对CAR-T功能（如IFN-γ分泌）进行精确评估。

2. 2. 靶细胞遗传背景对标准化检测的障碍

   此外，由于每种靶细胞系都有自己的遗传和表观遗传背景以及相应的表型，它们与CAR-T细胞的相互作用不可避免地会受到影响，这可能成为标准化检测的障碍。

3. 3. 体外实验中提取CAR-T细胞信息的挑战

   最后，体外实验中靶细胞与CAR-T细胞共同存在会使得在高通量遗传和表观遗传测序实验中提取CAR-T细胞特异性信息存在挑战性。为克服这些限制并满足标准化体外功能检测的需求，需要一种能够通过CAR分子特异性激活CAR-T细胞并触发重要效应功能的非细胞系统。

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ActiveMax^® Human CD19 μBeads, premium grade (for cells) (Cat. No. MBS-C002) can activate CD19-specific CAR-T cells by detecting the secretion of IFN-γ in vitro (Routinely tested).

Assay of human CD19 protein on the μBeads surface by Flow cytometry. The human CD19 conjugated on the μBeads (Cat. No. MBS-C002) surface were fluorescently stained using PE labeled anti-human CD19 antibody and analyzed by flow cytometry (QC tested).

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