荧光信号是流式细胞仪的重要检测信号。流式细胞术通过将待测细胞用特异性荧光染料标记,形成单列细胞柱,经过激光照射后,细胞会产生散射光和荧光信号。正是这些荧光信号,使流式细胞术成为生物医学研究和临床诊断中的关键技术。
实验中常常将荧光素偶联到特异性抗体上,利用抗体与细胞表面特征跨膜蛋白的结合,将荧光素精确标记到目标细胞上。当这些标记的细胞受到激光激发时,会产生特定波长的荧光,研究人员可以通过分析荧光信号,迅速获取样本细胞的特性信息。
荧光素(fluorochrome)是能够发出荧光的化学试剂,既有天然的、半天然的,也有人工合成的,甚至包括一些蛋白质。荧光素在未被激发时处于基态,当它吸收特定波长的激光能量后,外层电子跃迁至激发态。激发态的电子不稳定,会自发返回基态,并释放出特定波长的荧光,这就是荧光素产生荧光的原理。常用的荧光染料有PE,APC和FITC等,每种荧光素都有独特的特点,适用于不同的实验需求。
>>>> 1. PE(藻红蛋白)
PE是一种从红藻中提取的荧光蛋白,吸收光谱峰值在490–565 nm,发射光谱峰值约为578 nm,呈现明亮的橙色荧光。PE具有很高的量子产率,意味着它在吸收光子后能够高效地发射荧光,因此其信号亮度较高,适合用于低表达量抗原或少量细胞样本的检测。
>>>>2. APC(别藻蓝蛋白)
APC是一种从蓝绿藻中提取的荧光蛋白,吸收光谱峰值在650–655 nm,发射光谱峰值约为660–665 nm,发出的荧光为红色。APC的荧光信号可以与其他短波长荧光信号(如FITC的绿色荧光、PE的橙色荧光)清晰区分,减少光谱重叠带来的干扰。同时APC的量子产率较高,荧光信号也较强。此外,APC的长波长发射能够有效减少细胞自身的自发荧光干扰。
为满足市场需求,ACROBiosystems百普赛斯经过严格的方法学验证,自主研发出抗体荧光标记试剂盒。该试剂盒采用二硫键修饰技术,精准暴露抗体分子链间的半胱氨酸残基,可简单、快速地实现PE、APC等荧光素与抗体的共价偶联。生成的荧光标记抗体无需纯化,可直接使用,无标记抗体的损失,满足您多样化的抗体标记需求,助力流式细胞术相关分析研究。
试剂盒原理示意图
>>>> 产品优势
√ 操作简单:仅需孵育步骤,无需纯化。
√ 反应快速:仅需3 小时即可完成标记。
√ 高效反应:无标记抗体损失,效率高。
√ 一致性高:不同批次和规格性能一致。
√ 发光稳定:荧光亮度高,信噪比高。
√ 自主研发:现货供应,品质可靠。
操作流程示意图
>>>>验证数据
> 一致性高,不同批次和规格试剂盒性能一致
Binding signals of products prepared by different sizes of PE antibody labeling Kit (ALK-A001). The result shows very high consistency.
> 标记抗体经多种CAR细胞流式验证
> 发光稳定,荧光亮度高于竞品,信噪比高
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