调节性T细胞（Regulatory T cells，简称Treg）是一类具有重要免疫调节功能的T细胞亚群，在维持免疫稳态、预防自身免疫反应等方面起着至关重要的作用。Treg细胞通常占CD4+T细胞总数的5-10%，其特征是共同表达CD4、CD25、FOXP3及低水平的CD127。它们的主要功能是维持机体的免疫平衡，防止免疫系统攻击自身组织。
Treg细胞在CAR-T细胞治疗中的作用不容忽视。研究表明，Treg细胞的存在可能抑制CAR-T细胞的扩增、毒性及免疫反应，特别是在CD8+CAR-T细胞中，这一趋势尤为明显。Zinaida Good等人观察到，CD19 CAR-T治疗弥漫性大B细胞淋巴瘤（LBCL）患者时，CAR-T细胞的扩增与Treg细胞的比例呈负相关。这一发现表明，CAR-T细胞治疗时需要密切监测Treg细胞的比例，防止过多的Treg细胞抑制CAR-T细胞的活性。
Treg细胞的另一个关键作用是防止自身反应性细胞介导的病理性免疫应答，因此它们可用于治疗自身免疫性疾病、预防移植排斥反应及移植物抗宿主病（GvHD）。随着CAR技术的不断进步，特异性和功能强大的CAR-Treg也逐渐成为免疫治疗中的新兴力量。
在CAR-Treg细胞治疗过程中，Treg细胞的检测至关重要。CAR-Treg细胞的制备工艺涉及多个步骤，包括细胞纯化、载体生产与转导、CAR细胞扩增及放行等。尤其在细胞采集后的纯化和放行环节，Treg细胞的比例直接影响CAR-Treg的功能。由于Treg在外周血单个核细胞（PBMC）中通常仅占3%左右，因此必须通过精确的检测方法来确保CAR-Treg细胞的纯度和功能。
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Flow cytometric analysis of Human PBMC staining with APC-Labeled Monoclonal Anti-Human CD127 Antibody, Mouse IgG1(R514) (Cat. No. FABm011-02) at 1:20 dilution (5 μL of the antibody stock solution corresponds to labeling of 1e6 cells in a final volume of 100 µL), compared with isotype control antibody. APC signal was used to evaluate the binding activity.
参考文献
[1] Post-infusion CAR TReg cells identify patients resistant to CD19-CAR therapy
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