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生物分析方法开发服务(ELISA平台)

生物分析方法开发服务(ELISA平台)
背景
对于生物制品的质量控制,除对其进行必要的结构及理化性质检测,更需要对其生物学的结合活性、功能活性等生物活性进行检测。酶联免疫吸附测定验(Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测方法具有灵敏度高,检测快速,结果准确等优点,是一项被广泛应用的免疫检测技术。ELISA不仅可用于大分子结合力测定和筛选,如杂交瘤的滴度测定,噬菌体展示的淘选筛选,抗体及对应靶点蛋白或受体的亲和力评价等;也可用于大分子定性、定量检测,如抗体表达量监控,细胞因子的监控,药物的药代动力学,药效生物标志物的含量检测和免疫原性测定等。
ACROBiosystems百普赛斯拥有一支专业的产品研发团队和技术服务团队,凭借公司内部丰富的蛋白及抗体产品管线,在各种生物分析检测平台上均积累了大量的分析方法开发经验及实验数据。我们可根据不同需求,设计科学的实验方案,开发高效的检测方法,并进行全面、准确的方法学验证,为生物医药研发客户提供ELISA检测服务和ELISA试剂盒开发服务。
服务范围
按照原理及操作一般可将ELISA分析方法分为四类:直接ELISA,间接ELISA,夹心ELISA,竞争ELISA。所有ELISA分析方法都是隶属于这四类或者是其组合衍生。ACROBiosystems百普赛斯可按照客户检测目的,如:抑制剂筛选、 结合能力检测、生物活性定性&定量分析、PK药代动力学分析、免疫原性测定等需求,提供不同类型的ELISA检测服务和ELISA试剂盒开发一站式服务,全方位为您助力!
ELISA检测
检测流程

检测流程

案例分享

PD-L1抑制剂筛选检测(竞争法ELISA)

PD-L1抑制剂筛选检测(竞争法ELISA)

Anti-PD-1 neutralizing antibody was diluted from 10 μg/mL to 0.078 μg/ mL (69.628 nM to 0.544 nM) and loaded onto the plate coated by human PD-L1 in the presence of human PD-1-Biotin.

狂犬病毒(CVS-11 株)糖蛋白 G与小鼠单克隆抗糖蛋白 G(狂犬病毒)抗体亲和力检测(间接法ELISA)

狂犬病毒(CVS-11 株)糖蛋白 G与小鼠单克隆抗糖蛋白 G(狂犬病毒)抗体亲和力检测(间接法ELISA)

Immobilized Rabies virus (strain CVS-11) Glycoprotein G, His Tag (Cat. No. RAG-V55H5) at 5 μg/mL (100 μL/well) can bind Monoclonal Anti-Glycoprotein G (Rabies Virus) Antibody, Mouse IgG1 (1112-1) (Cat. No. GLG-M786) with a linear range of 0.039-2.5μg/mL (QC tested).

TNF-alpha蛋白含量检测(双抗夹心法ELISA)

TNF-alpha蛋白含量检测(双抗夹心法ELISA)

Immobilized Monoclonal Anti-TNF-alpha Antibody, Human IgG1 (13B8) (Cat. No. TNA-AM493) at 2 μg/mL, add increasing concentrations of Human TNF-alpha Protein, His Tag (Cat. No. TNA-H5228), and then add Biotinylated Monoclonal Anti-TNF-alpha Antibody, human IgG1 (16H5) (Cat. No. TNA-BLM494) at 0.25 μg/mL. Detection was performed using HRP-conjugated streptavidin with sensitivity of 0.02 ng/mL (Routinely tested).

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定制ELISA试剂盒开发
开发流程

开发流程

点击查看方法开发
点击查看方法验证

- 原料(抗原/抗体):您可自行提供或由ACRO提供(现有在线产品或定制开发)

- 检测方法:

1. 确定待检物类型及实验用途(抗原或抗体,定性或定量)

2. 确认检测方法(双抗夹心法、竞争法、间接法)

- 检测方法

1. 抗原或抗体标记:根据开发ELISA的类型确定标记抗原或者抗体。一般标记HRP或者生物素

2. 抗原抗体使用浓度优化:检测不同浓度抗原与抗体的反应灵敏度、特异性,确定最佳的抗原与抗体的使用浓度

3. 包被条件及反应条件优化:确定包被缓冲液、洗涤缓冲液及酶结合物保存液;确定抗体反应温度及反应时间

- 预实验:主要是对灵敏度和特异性进行评估。预实验的成功与否会直接影响到实验的后续工作

方法验证

案例分享

1. 水痘-带状疱疹病毒(VZV)gE抗原含量检测试剂盒(Cat. No. RAS-A102)

- 灵敏度高:经检测,该试剂盒检测范围39-1250 pg/mL,灵敏度达到39 pg/mL

水痘-带状疱疹病毒(VZV)gE抗原含量检测试剂盒

- 准确度:经检测,该试剂盒加标回收率在80% - 120%

水痘-带状疱疹病毒(VZV)gE抗原含量检测试剂盒

- 精密度:经检测,试剂盒板内及板间精密度CV值均 <10%

水痘-带状疱疹病毒(VZV)gE抗原含量检测试剂盒

2. 狂犬病毒糖蛋白G ELISA试剂盒(Cat. No. RAS-A167)

- 标准曲线可信度高;检测灵敏度可达0.3 ng/mL

标准曲线可信度高

通过夹心酶联免疫吸附试验检测糖蛋白 G (RABV)。
固定化的抗糖蛋白 G(RABV)抗体可与糖蛋白 G(RABV)结合。使用 HRP-抗糖蛋白 G(RABV)抗体进行检测,灵敏度< 0.3 ng/mL(QC 测试)。每次实验都需要为每个微孔板设定标准曲线,具体的 OD 值可能会因实验室、测试仪或设备的不同而有所差异。以下示例数据仅供参考。

- 基质效应低,结果更准确

标准曲线可信度高

用不同比例的空白培养基对标准品进行梯度稀释,验证稀释液中含有10%的1640培养基的干扰,RSD(OD值)在1.0-14.4%范围内;验证稀释液中含有10%的DMEM培养基的干扰,RSD(OD值)在2.3-12.6%范围内。建议样本的MRD为1:10。

- 经严谨精密度测试, CV≤15%

标准曲线可信度高

板内精密度:3个已知浓度的样本酶标板内重复测试20次,以评估酶标板内的精密度。

板间精密度:3个已知浓度的样本酶标板间重复测试3次,以评估酶标板间的精密度。

经验证该项目的板内及板间精密度CV≤15%,满足试剂盒申明的标准范围。

- 严格质控标准,回收率符合法规要求

标准曲线可信度高

设置四个质控点浓度,每个质控点浓度重复20次,计算回收率均在80-120%范围内。

标准曲线可信度高

将高浓度的标准品加入到不同的稀释基质中,计算不同稀释比例下的回收率,均在80-120%范围内。

ELISA服务周期

ELISA服务周期

我们的优势
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