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过继性T细胞疗法CMC生产工艺解决方案

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T淋巴细胞在人体免疫系统中扮演重要的角色,过继性T细胞疗法就是利用特定类型T细胞的固有功能来对抗疾病。常见的T cell-based therapy有CAR-T疗法、TIL疗法等,这些疗法作为革命性的技术手段,在患者中产生了持久且有效的临床反应。目前,用于工程T细胞的CMC工艺是这一领域最大的挑战之一,该过程包括各种复杂的程序,涉及T细胞体外激活、扩增、工程化改造等步骤。
ACROBiosystems百普赛斯专注于支持免疫细胞疗法相关研究,基于完善的细胞培养平台、抗体开发平台、流式细胞术验证平台以及GMP质量管理体系,我们开发了一系列用于T细胞CMC生产工艺阶段的相关原料和服务,并提供完善解决方案,以支持全球科学家和药企的过继性T细胞疗法的开发进程。
过继性T细胞疗法CMC生产工艺解决方案

以CAR-T细胞为例,成熟的CAR-T细胞产品制备方法Workflow

过继性T细胞疗法CMC生产工艺解决方案

  • T细胞激活
  • T细胞培养
  • T细胞工程化改造
  • CMC工艺纯化

T细胞激活

通常使用抗CD3抗体和抗CD28抗体或CD3/CD28抗体偶联磁珠模拟体内的第一和第二刺激信号过程激活T细胞,并添加相关的细胞生长因子,它们是体外刺激T细胞培养不可或缺的试剂。
T细胞激活用GMP级别产品
产品优势

可高效激活扩增T细胞,
性能优越

遵循GMP级别质量体系,无动
物源成分,更好的安全性

严格的病毒
去除步骤和检测

高稳定性
高批间一致性

Effective stimulation and Excellent proliferation
T细胞激活

Figure 1. The human T cells were stimulated with GMP ActiveMax® Human T cell Activation/Expansion CD3/CD28 Beads (Cat. No. GMP-MBS001) for 24hrs, and the activation was assessed by measuring expression of both activation markers CD25 and CD69 expression on the T cells surface by stanning with PE labeled anti-human CD25 antibody and FITC labeled anti-human CD69 antibody respectively (QC tested).

T细胞激活

Figure 2. The human T cells were labeled with carboxy fluorescein succinimidyl ester (CFSE) and stimulated with GMP ActiveMax® Human T cell Activation/Expansion CD3/CD28 Beads (Cat. No. GMP-MBS001), and then the proliferation of the T cells was assessed with CFSE dilution assay by flow cytometry on day 5 after stimulation (QC tested).

T细胞激活

Figure 3. Activation of the purified human T Cells. The purified human T cells were activated using Human T cell Activation/Expansion CD3/CD28 Beads, (Cat. No. GMP-MBS001) and Competitor-Beads respectively for 24 hours with CTS Optimizer Medium. Cells were fluorescently stained using PE labeled anti-human CD25 antibody and labeled FITC anti-human CD69 antibody and analyzed by flow cytometry.

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Treg细胞

Treg细胞

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T细胞培养用GMP级别产品
产品优势

全方位质量放行验证,
16项质量控制指标

更好的安全性(无菌,
支原体、外源病毒,
各项杂志残留检测)

药品级生产厂房

支持线上线下审计

完成FDA DMF备案

High expansion
T细胞培养

Figure 1. Cell growth curves of PBMCs cultured with IL-2. Varying concentrations of GMP IL-2 (Cat. No. GMP-L02H14) were added as a growth factor supplement to PBMCs revealing optimal cell expansion using a concentration of 500 IU/mL at Day 14.

T细胞培养

Figure 2. Cell viability curve of PBMCs cultured with IL-2. Increasing concentrations of GMP IL-2 (Cat. No. GMP-L02H14) were added as a growth factor supplement to PBMCs showing consistent and high cell viabilities up to Day 14.

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T细胞工程化用GMP级别产品
产品优势

高纯度、高酶活、
高切割效率

具有核定位信号,
增强编辑效率

无菌、超低内毒素

在符合GMP的工厂进行
生产并进行QC测试

产品验证数据
T细胞疗法生产解决方案 高生物活性经体内外酶活验证,高TCR敲除活性。
T细胞工程化改造
T细胞工程化改造

Different amounts of Cas9 were incubated with the same amount of excess gRNA and plasmid for 60 minutes at 37°C. When using 400-200 ng Acro Cas9, the cutting efficiency is greater than 90%. In comparison, when using a 200 ng Competitor T, the cutting efficiency is only about 50%.

T细胞工程化改造
T细胞工程化改造

The TCR knockout efficiency with GMP GENPower™ NLS-Cas9 Nuclease in human primary T cells, GMP GENPower™ NLS-Cas9 Nuclease achieved over 95% knockout efficiency.

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ACROBiosystems百普赛斯依托酶改造技术平台,通过协同AI模拟计算和高通量筛选,自主开发的GMP级别全能核酸酶(常规版本:GMP-NUES19 ,耐高盐版本:GMP-NUES13)是生物药工艺流程中去除核酸污染的理想选择!

CMC工艺纯化用GMP级别产品
产品优势

盐浓度适应范围广,中、
高盐条件下仍具有高酶活

稳定性高,37°C保存21天,
酶活不受影响

下游工艺无需透析、脱盐,
节省时间

GMP条件生产,满足从研发到
生产的大规模使用需求

产品验证数据
T细胞疗法生产解决方案 高酶活性能
CMC工艺纯化用GMP级别产品

GMP Salt Active GENIUS™Nuclease (货号:GMP-NUES13) 在0-500mM NaCl条件下,均能保持高酶活;且0-500mM条件下GMP-NUES13的酶活显著优于竞品。

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