近年来,随着抗体偶联药物( Antibody-Drug Conjugate,ADC)的飞速发展,偶联药物领域形成了“万物皆可偶联”的态势。针对以抗体为载体的偶联药物,其偶联方式直接决定药物抗体偶联比(DAR)和均一性,进而影响药物的活性、耐受性和稳定性。
偶联方式一般分为随机偶联和定点偶联,其中定点偶联因其能够获得高均一性、高安全性的偶联药物,已获得越来越多的青睐。
经典的定点偶联方法包括引入反应性半胱氨酸、二硫键重桥、非天然氨基酸技术、融合标签介导的偶联技术、临近诱导抗体偶联技术和糖基偶联技术。
其中糖基偶联技术利用抗体Fc端保守的N297糖基化位点实现偶联。此位点远离抗体抗原结合的功能结构域,因此利用该位点进行偶联不会对抗体的结合功能造成影响,降低在偶联后损害抗体的抗原结合能力的风险。而且此方法无需对抗体进行工程化改造,提高了便捷性和普适性,极大地加速了早期研发的效率。
ACROBiosystems百普赛斯与岩唐生物科技(杭州)有限责任公司合作推出了AGLink®新型DAR2&4定点偶联试剂盒,该试剂盒基于岩唐生物的YTConju™糖基偶联技术平台开发,包含毒素(MMAE)、反应官能团(Tz/DBCO)、检测标签(Biotin)三大模块,为偶联药物的早期研究及相关生物学实验提供强大支持。
操作简便,“One-Pot”&“One-Step”
反应效率高,overnight至24h即可实现较高DAR值产物的偶联
分设不同模块,满足多元化偶联需求
一个试剂盒即可实现DAR2或DAR4偶联
偶联产物具有良好的均一性和稳定性
For DAR4 Conjugation
For DAR2 Conjugation
偶联MMAE,供ADC领域早期药物筛选、制备和性能研究
DAR 4 & DAR 2 ADC的HIC-HPLC分析
DAR 4 & DAR 2 ADC的HER2抗原结合力分析
DAR 4 & DAR 2 ADC的SEC-HPLC分析,聚体< 5%
DAR 4 & DAR 2 ADC的人血浆(体外)稳定性。DAR 4 & DAR 2 ADC在人血浆(体外)中稳定无降解
DAR 4 & DAR 2 ADC的体外细胞杀伤活性验证
DBCO: 搭配N3基团,简单易行,N3基团修饰分子具有更好的亲水性。
Tetrazine: 搭配BCN或TCO基团,具有更高的反应效率,更适合复杂分子的偶联。
利用点击化学反应,实现多种MOI的偶联,包括Toxin、Fluorescent dye、Oligonucleotide、Nanobody等。
检测或者诊断类抗体的筛选和制备
相比于传统化学标记,制备的产物更加均一,批次稳定性更好
分子 | 货号 | 产品描述 | 订购/预购 |
---|---|---|---|
MMAE | ADC-P005 | AGLink® ADC Conjugation Kit (MMAE, DAR2&4, 1mg) | |
Tetrazine | ADC-P006 | AGLink® ADC Conjugation Kit (Tetrazine, DAR2&4, 1mg) | |
DBCO | ADC-P007 | AGLink® ADC Conjugation Kit (DBCO, DAR2&4, 1mg) | |
Biotin | ADC-P008 | AGLink® ADC Conjugation Kit (Biotin, DAR2&4, 1mg) | |
MMAE | ADC-P009 | AGLink® ADC Conjugation Kit (MMAE, DAR2&4, 5mg) | |
Tetrazine | ADC-P010 | AGLink® ADC Conjugation Kit (Tetrazine, DAR2&4, 5mg) | |
DBCO | ADC-P011 | AGLink® ADC Conjugation Kit (DBCO, DAR2&4, 5mg) | |
Biotin | ADC-P012 | AGLink® ADC Conjugation Kit (Biotin, DAR2&4, 5mg) |
1. 试剂盒适用的最小抗体规格是多少?
本试剂盒适用的最小抗体规格为200ug,抗体回收率可达到85%以上。按照Protocol等比例缩小反应试剂用量即可。
2. 抗体是否一定要按照Protocol进行浓缩处理?
为保证反应效率,最好按Protocol浓缩抗体至推荐浓度。若不能浓缩,抗体浓度不能低于1mg/ml,且最好延长反应时间至48h来保证偶联效率。
3. 此试剂盒是否对所有种属抗体均适用?
此试剂盒可高效完成人源化抗体的偶联。鼠抗和兔抗结构较为复杂,未进行完全验证,建议延长偶联时间至48h来提高偶联效率。
4. AGLink® ADC偶联试剂盒里面的Linker可否被水解?用什么水解?
AGLink® ADC Conjugation Kit (MMAE,DAR2&4,1mg&5mg)试剂盒中的Linker为vc-PAB,可被Cathepsin B裂解。其他试剂盒中的Linker取决于点击化学偶联时采用的Linker是否为可裂解Linker。
5. 试剂盒偶联效率怎么样,用什么方法检测偶联产物的DAR值?
此试剂盒偶联效率可达90%以上,DAR值可用HIC-HPLC(MMAE)或LC-MS(MMAE/DBCO/Tetrazine/Biotin)检测。
6. 偶联产物如何存放? 稳定性如何?
偶联产物建议置换入PBS缓冲液中,-80℃可保存半年以上,请避免反复冻融。
7. 偶联MMAE毒性小分子是否对实验室安全等级有要求?
此试剂盒对实验室安全等级无要求,操作时请注意穿戴白大褂和手套,避免接触皮肤,眼睛和误食。
8. 此试剂盒有专利限制吗? 商业化生产时有专利保护影响吗?
此试剂盒有专利保护,如需商业化放大生产请与我们联系。
9. N297位点突变后,是否只能非定点偶联?
目前的偶联试剂盒基于糖基化位点的定点修饰,N297糖基被去掉以后不能再使用此试剂盒。但可通过其它方法实现定点偶联。
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