同种异体CAR-T细胞（UCAR-T），又称现货CAR-T疗法，基本的生产流程为（图1）：首先从健康供体内分离T淋巴细胞，通过病毒载体将CAR基因和其他基因（如自杀基因和共刺激受体等）转导入T细胞中，并利用基因编辑技术敲除会引起移植物抗宿主反应（GvHD）和免疫系统排斥的相关基因（TCRHLA等），然后使用抗CD3 /抗CD28的磁珠或细胞因子等刺激扩增T细胞，经严格质检、分装、冷冻储存后，随时供患者使用。
图1 UCAR-T制备流程[1]
UCAR-T相比于自体CAR-T，在细胞来源、生产制造过程、临床表现以及价格等方面均有不同（图2）。
总体来说，UCAR-T主要有以下突出特点：
1）可“现货供应”，无需漫长的制备等待时间，有效避免因等待过程长而导致的其他风险；
2）产品原料T细胞来自健康供者，经过严格的筛查程序，T细胞活性强，可有效避免肿瘤污染；
3）适应范围广，患者无因制备失败或因不符合制备标准而丧失治疗机会；
4）可按照GMP标准生产过程质量控制，产品质量可控；
5）工业化生产，可有效降低成本及治疗费用，减轻个人及社会医疗负担，扩展可及性。
图2 UCAR-T和自体CAR-T的区别[2]
UCAR-T因其突出的优势，使得全球多家企业争先布局UCAR-T细胞疗法的研发管线，但不同于自体CAR-T疗法在临床应用中遍地开花的局面，目前进入临床开发的UCAR-T企业还很少（图3）[1]，一般是拥有核心基因编辑技术平台的企业，比如国外的Cellectis、Precision、Celyad，国内的亘喜生物、邦耀生物、北恒生物等UCAR-T研发企业。
1）Cellectis：法国 Cellectis 拥有目前全球临床进展最快的UCART疗法。包括四个靶点的研发管线，分别为CD19、CD123、CD22以及CS1，其中UCART19项目与Pfizer、Servier等多家公司授权合作。
2）Poseida Therapeutics：专注于开发新型CAR-T疗法的Poseida，利用非病毒piggyBac(PB)DNA转座技术和CAS-Clover基因编辑系统等先进技术平台，开发了P-BCMA-ALL01、P-MUC1C-ALLO1、P-PSMA-ALLO1、Dual CAR (CD19/CD20)等一系列通用型CAR-T产品。
3）CRISPR Therapeutics：CRISPR Therapeutics采用CRISPR基因编辑技术开发的靶向BCMA和CD70的UCAR-T细胞疗法具有编辑率高、特异性好、细胞杀伤力强的特性。
4）Celyad：该公司的CYAD-101（靶向NKG2DL）是第一个非基因编辑的UCAR-T临床项目。CYAD-101的CAR不含识别肿瘤表面抗原的抗体片段，而是包含完整的人类NKG2D 受体，CYAD-101与化疗联合治疗的情况下显出非常低的脱靶效应。
5）Precision BioSciences：Precision利用基于ARCUS基因编辑核心技术平台布局了多条UCAR-T研发管线，其中PBCAR0191是Precision与Servier共同开发的第一款靶向CD19的UCAR-T产品，目前处于临床I期阶段。
1）亘喜生物：亘喜生物开发的TruUCAR专利技术，使得同种异体CAR-T细胞可在HLA不匹配的患者体内增殖并持续存在，同时可以控制GvDH的风险。GC027是亘喜生物在研的一款UCAR-T细胞疗法，能够靶向CD7抗原表达的肿瘤细胞，用于治疗T细胞恶性肿瘤。
2）北恒生物：CTA101是北恒生物利用CRISPR/Cas9基因编辑技术，开发的一款CD19/CD22双靶点UCAR-T细胞疗法，数据提示其具有良好的耐受性以及强效的抗肿瘤作用。
3）邦耀生物：邦耀生物也搭建了成熟的基因编辑和细胞治疗产品研发平台，目前公司已布局靶向CD19、BCMA、PSMA等靶点的UCAR-T研发管线。
图3 全球UCAR-T领先企业研发产品汇总表[1]
文尾扫码，即可获取全球UCAR-T领先企业的研发管线图谱~
结语
UCAR-T有明显突出优势的同时也具有较高的技术壁垒，所以在实际应用中仍存在一些关键性问题，比如微量的TCR阳性CAR-T细胞引起的GvDH反应、基因编辑存在的脱靶效应、免疫系统排斥导致UCAR-T细胞在体内不易扩增等一系列技术难点，并且当前大多数UCAR-T研发项目均处在临床前或临床早期阶段。因此期待更加完善的技术手段和更丰富的临床研究数据来保证UCAR-T细胞疗法安全性和有效性。
ACROBiosystems提供CD19、BCMA、CD123、CD22、SLAMF7、CD7等50多种CAR-T靶点蛋白，涵盖Biotin、FITC、PE等多种标记类型，具有高特异、高灵敏、高批间一致的特性，经FACS验证适用于CAR表达检测，支持您的UCAR-T细胞研发进程。
流式验证数据
1e6 of the anti-CD19 CAR-293 cells were stained with 100 μL of 1:50 dilution (2 μL stock solution in 100 μL FACS buffer) of PE-Labeled Human CD19 (20-291), His Tag (Cat. No.CD9-HP2H3). PE Streptavidin was used as negative control (QC tested).
1e6 of the anti-SLAMF7 CAR-293 cells were stained with 100 μL of 1:50 dilution (2 μL stock solution in 100 μL FACS buffer) of PE-Labeled Human SLAMF7, His Tag (Cat. No.SL7-HP2H3) and negative control protein respectively, PE signals was used to evaluate the binding activity (QC tested).
293 cells were transfected with anti-CD22-scFv and RFP tag. 2e5 of the cells were stained with FITC-Labeled Human Siglec-2, His Tag (Cat. No. SI2-HF2H6, 10 µg/mL) and FITC-labeled Protein Control. Non-transfected 293 cells and FITC-labeled Protein Control were used as negative control. RFP was used to evaluate CAR (anti-CD22-scFv) expression and FITC was used to evaluate the binding activity of FITC-Labeled Human Siglec-2, His Tag (Cat. No. SI2-HF2H6) (QC tested).
为让大家更全面的了解当前UCAR-T产品的研发布局态势，我们整理了全球UCAR-T领先企业的研发管线图谱，扫描下方二维码，即可获取资料包~
您可通过以下方式联系到ACROBiosystems：
邮件：inquiry@acrobiosystems.com
电话：18811625790
微信：扫描下方二维码即可进行沟通
(请备注公司+姓名）
参考文献
[1] Depil, S., Duchateau, P., Grupp, S.A. et al. ‘Off-the-shelf’ allogeneic CAR T cells: development and challenges. Nat Rev Drug Discov 19, 185–199 (2020).
[2] 各公司官网；
Star Ribbon预染蛋白Marker蛋白质标记物是生物研究和药物开发的重要组成部分。无论是用于蛋白质电泳还是western blot，我们的预染色蛋白质标记物帮助您快速确定目标蛋白质的分子量或评估转移效率。Fc受体蛋白治疗性抗体的功效取决于Fab片段及其对目标抗原的结合活性，还取决于Fc片段及其与关键Fc受体的相互作用。因此，在抗体工程中候选物必须针对一系列受体进行测试。探索我们的重组Fc受体蛋白质的全面收藏！
膜杰作
Star Staining
